การดีเบตของผู้สมัครประธานาธิบดีรอบสองและรอบสุดท้ายจัดขึ้นที่เมืองแนชวิลล์ รัฐเทนเนสซี โดยมีคริสเทน เวลเกอร์ ผู้ประกาศข่าวจากสถานีโทรทัศน์เอ็นบีซี นิวส์เป็นผู้ดำเนินรายการ และมีมาตรการป้องกันโรคโควิด-19 เพิ่มมากขึ้นจากการดีเบตรอบแรกเมื่อวันที่ 29 ก.ย. โดยบังคับให้ผู้ฟังการดีเบตสวมหน้ากาก นั่งเว้นระยะห่าง ตรวจหาเชื้อโควิด-19 ก่อนร่วมงาน นอกจากนี้ทั้งประธานาธิบดีทรัมป์และไบเดนได้รับการยืนยันว่าผลตรวจโควิด-19 เป็นลบ ทำให้ทางผู้จัดงานยกแผ่นกั้นใสที่ตอนแรกตั้งเตรียมไว้บนเวทีออกไป
การดีเบตนาน 90 นาที แบ่งเป็น 6 ช่วง ตอบคำถาม 6 เรื่อง ได้แก่ โรคโควิด-19,ครอบครัวอเมริกัน, ปัญหาเชื้อชาติ, ภาวะโลกร้อน, ความมั่นคงแห่งชาติ และภาวะผู้นำ ผู้สมัครมีเวลาตอบคำถามคนละ 2 นาทีในช่วงแรกของแต่ละคำถาม และคู่แข่งจะถูกปิดไมโครโฟนในช่วงนั้นเพื่อป้องกันไม่ให้พูดขัดจังหวะ แต่เวลาที่เหลือสามารถโต้เถียงกันได้
กฎใหม่ข้อนี้ช่วยควบคุมให้การดีเบตรอบนี้ราบรื่น ไม่มีการพูดแทรกเหมือนรอบแรก รวมทั้งได้เนื้อหาสาระหลากหลายประเด็นอย่างรอบด้านเพื่อประกอบการตัดสินใจของชาวอเมริกันในวันที่ 3 พ.ย. นอกจากนี้ทรัมป์ใช้เวลาพูดรวม 41 นาที ขณะที่ไบเดนได้พูดเกือบ 38 นาที แตกต่างจากรอบแรกที่ทรัมป์พูดขัดจังหวะไบเดนแทบทุก 1 นาที แต่ทั้งคู่ยังโจมตีอีกฝ่ายในหลายประเด็นอย่างร้อนแรง